HuCAL®抗体の技術概要、使用例、アッセイプロトコールなど

Western Blot、ELISA、免疫沈降法などで使用できるフォーマットの一覧

Fab抗体に付与できるタグの一覧

Fab抗体に付与できるタグの配列と分子量

2次抗体やポジティブコントロール等の試薬情報

抗体職人で使用する抗原（タンパク質、ペプチド、低分子化合物）に必要な要件

第47回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

PURE system におけるアンバーサプレッションによる非天然アミノ酸導入の最適条件の探索
Exploration of optimal conditions for the incorporation of noncanonical amino acids by amber suppression using the PURE system

PUREfrex®を用いたアンバーサプレッションの最適条件を探索した。モデルタンパク質として大腸菌ジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)のN末端側にS-tag (KETAAAKFERSQHMDS)を付加したコンストラクトを用い、BODIPYFL-aminophenylalanine
(BFLAF) が付加されたアンバーサプレッサーtRNAによりS-tag中にBFLAFが導入されたタンパク質を合成し、サプレッション効率を比較した。

第47回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系（PUREfrex®）を用いた低濃度のDNAからのタンパク質合成
Protein synthesis from low concentration DNA using a reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex®)

PUREfrex反応液は、2 nM DNAから合成したときに合成量が最大になる用に最適化されているが、酵素や抗体などのタンパク質の高性能化スクリーニングにおいては、少量のDNAが含まれる微小空間で転写・翻訳反応を行い、機能評価を行うこともある。そこで本研究では、低濃度のDNAから転写・翻訳反応を行う場合に適した反応液組成を検討した。

第24回 日本蛋白質科学会年会で発表したワークショップの資料がご覧頂けます。

WS19: モデル生物大腸菌における翻訳制御研究の最前線
発表番号: WS19-1
〇大腸菌由来の再構成型無細胞系内での翻訳反応は大腸菌細胞と同一か?
〇Is the translation reaction in a reconstituted E. coli-based cell-free system identical to that in E. coli cells?
〇演者: 金森 崇 (ジーンフロンティア(株))

第24回 日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系(PUREfrex®)を用いた標的タンパク質のN末端ミリストイル化の効率向上
Improving efficiency of N-Terminal myristoylation of target proteins using a reconstituted cell-free protein synthesis system

標的タンパク質のN末側にTEVプロテアーゼ切断サイトを付加し、TEVプロテアーゼを加えた反応液で合成およびミリストイル化を行った。リポソーム内で翻訳後ミリストイル化を行った結果、膜への局在化は60%程度まで向上した。さらにプラスチャージのアミノ酸配列の付加や修飾する脂質の検討により、ナノディスクへの挿入効率が向上した。

第46回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系（PUREfrex^®）を用いたタンパク質合成におけるN末端アミノ酸配列の影響
Effect of N-terminal amino acid sequence on the protein synthesis using a reconstituted cell-free protein synthesis system （PUREfrex^®）

目的タンパク質のN末端領域のアミノ酸配列が、タンパク質合成に与える影響。PUREfrex^®を用いてタンパク質を合成する際は、N末端のアミノ酸配列を改変することで合成量が増加することが示唆された。

第23回 日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系（PUREfrex^®）を用いたタンパク質合成におけるN末端アミノ酸配列の影響
Effect of N-terminal amino acid sequence on the protein synthesis using a reconstituted cell-free protein synthesis system （PUREfrex^®）

目的タンパク質のN末端領域のアミノ酸配列が、タンパク質合成に与える影響。PUREfrex^®を用いて低温でタンパク質を合成する際は、N末端のアミノ酸配列を改変することで合成量が増加することが示唆された。

第23回 日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系（PUREfrex^®）を用いた標的タンパク質のN末端翻訳後修飾
N-terminal post-translational modification of target proteins using a reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex^®)

PUREfrex^®を用いた翻訳後修飾タンパク質の合成例として、N 末端にアセチル基またはミリストイル基を付加したタンパク質の合成を行った 。

第45回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

PUREfrexRDによる機能性環状ペプチドの網羅的親水化改変
Comprehensive improvement of hydrophilicity for functional cyclic peptide using PUREfrexRD

PUREfrex🄬RDを使うことで、疎水性の高いペプチドに容易に網羅的な親水性アミノ酸の導入がすることが可能であることがわかった。

第45回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系(PUREfrex)によるN末端翻訳後修飾されたタンパク質の合成
Synthesis of N-terminal post-translationally modified proteins using PUREfrex

PUREfrexを用いた翻訳後修飾として、N 末端にミリストイル基もしくはアセチル基を付加したタンパク質の合成について検討した。

第45回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。

再構成型無細胞タンパク質合成系(PUREfrex)における翻訳開始過程に関与する因子の必要性
Requirement of factors involved in the initiation process in the reconstituted cell-free protein synthesip35_MBSJ2022s system (PUREfrex)

PUREfrexでの翻訳において、大腸菌の翻訳反応に必須の翻訳開始因子 (IF1、IF2、IF3) と、開始メチオニンに付加されるフォルミル基のドナー (10-CHO-THF) の必要性について検討した。

第95回 日本生化学会で発表したポスターがご覧頂けます。

大腸菌由来再構成型無細胞タンパク質合成系（PUREfrex）を用いたタンパク質合成における鋳型DNA配列の影響
Effect of the template DNA sequence on the protein synthesis using the E.coli-derived reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex)

PUREfrex 用の鋳型DNAについて、これまで得られてきた知見をまとめています。N末端側の遺伝子配列、アミノ酸配列、５’UTRの配列について、同じタンパク質でも配列によって合成量に差がでることがわかっています。

第22回 日本蛋白質科学会年会で口頭発表したスライドがご覧頂けます。

< Synthesis of glycosylated proteins using PUREfrex® >

大腸菌 Colicin-E7 immunityprotein にN 型糖鎖付加配列を挿入したモデルタンパク質 (Im7-6) 、ならびに数種類の糖転移酵素を PUREfrex でそれぞれ合成し、これらと糖供与体を混合して Im7-6 の糖鎖修飾反応 (in vitro glycosylation (IVG)) を行った。反応後の SDS-PAGE および質量分析により、糖鎖付加配列中のアルギニン残基へのグルコース付加を起点とし、ガラクトース、GlcNAc 、シアル酸の付加を確認した。さらに、 Im7-6 と糖転移酵素の合成および糖鎖修飾反応を one-pot で同時に行ったところ、この方法でも糖鎖修飾された Im7-6 を確認できた。また、ジスルフィド結合を含むタンパク質や膜タンパク質に対しても、糖鎖付加が可能であることを確かめた。

第44回 日本分子生物学会で発表したポスターがご覧頂けます。
Synthesis of glycosylated proteins using PUREfrex with glycosyltransferase
＜N型糖鎖修飾、糖鎖付加配列挿入のモデルタンパク質、ジスルフィド結合タンパク質、膜タンパク質＞

第44回 日本分子生物学会で発表したポスターがご覧頂けます。
Exploration of the template DNA sequence suitable for the E.coli-based reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex)
＜鋳型DNAのORF、5’UTR、タンパク質合成量への影響、まとめ＞

第21回 日本蛋白質科学会で発表したポスターがご覧頂けます。
Protein synthesis form the bicistronic template DNA using the E.coli-based reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex®)
＜鋳型DNAの構造と合成に与える影響、bicistronic、5’UTR、AT-rich領域、リボソーム結合配列、mCherry、GFP＞

第43回 日本分子生物学会で発表したポスターがご覧頂けます。
Investigation on how to synthesize active proteins by using a reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex)
＜シャペロン濃度、合成後にシャペロン添加、界面活性剤、温度の最適化。hAChE、PPK2、Luciferase＞

第93回 日本生化学会大会で発表したスライドがご覧いただけます。
Exploration of the template DNA sequence suitable for the E. coli-based reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex®)
2020年9月 <PDF: 3MB>

第42回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Effect of 5’UTR of template DNA on the protein synthesis using the reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex^®).
2019年12月3日(火) <PDF: 3MB>

第42回 日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
In vitro selection and affinity maturation of CTLA-4 binding cyclic peptide with PUREfrexRD, and conversion of the peptide to small molecules.
2019年12月3日(火) <PDF: 3MB>

PEGS2019で発表したポスターがご覧いただけます。
Selection and Affinity Maturation of Cyclic Peptide Against CTLA4 with PUREfrexRD.

第19回 日本蛋白質科学会年会　第71回 日本細胞生物学会大会　合同年次大会で発表したポスターがご覧頂けます。
Exploration of nucleotide sequence of template DNA suitable for the reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex)
＜コード領域全体のコドン検討、開始コドン上流の配列検討＞

第41回 日本分子生物学会で発表したポスターがご覧頂けます。
Improvement of the translation efficiency of proline residue-containing poteins using the reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex)
＜連続する、あるいはN末端やC末端付近のProlineが合成量に及ぼす影響。EF-P、RF2＞

第91回 日本生化学会大会で発表したポスターがご覧いただけます。
Synthesis of proteins containing consecutive proline residues using the reconstituted cel-free protein synthesis system (PUREfrex)
＜EF-P、連続したプロリンが合成に及ぼす影響＞

第18回日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Synthesis of proteins containing disulfide bonds using PUREfrex^® with human protein disulfide isomerase
＜ジスルフィド結合の最適化、hPDI、DsbC、GSSG、hEro1α＞

ConBio 2017 で発表したポスターがご覧いただけます。
Preparation of labeled cyclic peptide with PUREfrex.
＜ピューロマイシンでラベル化した環状ペプチドの高効率な調製法＞

第17回日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Analysis of the redox state in a reconstituted cell-free protein synthesis system (PUREfrex^®)
＜合成するタンパク質に合わせた還元剤の選択と最適化、ジスルフィド結合形成への影響＞

第17回日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Development of a method for the synthesis of aglycosylated full-length IgG using PUREfrex
＜H鎖とL鎖の合成条件とジスルフィド結合の最適化、IgG抗体の合成・精製＞

第39回日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Improvement of translational efficiency by N-terminal codon optimization in the reconstituted cell-free protein synthesis system
＜高頻度コドンよりN末のATリッチ化、より多くのタンパク質で検証、膜タンパク質の合成量アップと精製＞

第39回日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Efficient in vitro expression of aglycosylated full-length IgG using a reconstituted cell-free protein synthesis system, PUREfrex 2.0
＜148kDaのIgG抗体を合成・精製、反応組成とインキュベーションの最適化、標品と変わらぬクオリティー＞

第16回日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Improvement of translational efficiency by N-terminal codon optimization in the reconstituted cell-free protein synthesis system
＜N末のATリッチ化、N末のHisタグ配列の最適化、N末にSKIKの付与＞

BMB2015で発表したポスターがご覧いただけます。
In vitro production of Fab, Toxin, and Immunotoxin using PUREfrex®2.0 with increased productivity

第15回日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Performance of PUREfrex®2.0 with increased productivity and its application

PEGS2015で発表したポスターがご覧いただけます。
Simple and Effective Selection of cyclic peptides by Ribosome display with PUREfrex®

PEGS2015で発表したポスターがご覧いただけます。
Performance and application of PUREfrex® 2.0 with increased productivity

第85回　日本生化学会大会で発表したポスターがご覧いただけます。
Synthesis of functionally active proteins using the new PURE system (PUREfrex®)

第34回　日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
In vitro selection from designed protein scaffold library with Ribosome Display on PURE system

第34回　日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
Synthesis of functionally active proteins containing disulfide bonds using the new PURE system (PUREfrex™)

第84回　日本生化学会大会で発表したポスターがご覧いただけます。
Development of novel PURE system – PUREfrex –

BMB2015で発表したポスターがご覧いただけます。
Simple and Effective Selection of cyclic peptides by Ribosome display with PUREfrex®

PEGS2014で発表したポスターがご覧いただけます。
PUREfrex RD: the unique antibody engineering method based on Ribosome Display with PUREfrex®

第35回　日本分子生物学会年会で発表したポスターがご覧いただけます。
In vitro affinity maturation based on Ribosome Display System with PUREfrex®

第11回　日本蛋白質科学会年会で発表したポスターがご覧頂けます。
Development of cell-free protein synthesis system suitable for ribosome display.